腦切片是神經(jīng)科學(xué)研究中的重要技術(shù)，指將大腦組織切割成薄片更加廣闊，用于觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu)發展需要、神經(jīng)連接或病理變化問題分析。核心步驟包括取材形勢、固定開展試點、切片不斷進步、染色和成像保供，常用方法有冷凍切片和石蠟切片，應(yīng)用涵蓋疾病診斷影響力範圍、腦功能研究及藥物開發(fā)大局。

小鼠小腦切片取自雄性和雌性正常型及Ube3a?/? P9-P11小鼠幼崽，如前所述邁出了重要的一步。簡而言之有序推進，小腦矢狀面切片（300-μm厚）是在MacIlwain組織切割器上切割的，并轉(zhuǎn)移到具有0.4-μm孔徑的30-mm Millipore培養(yǎng)插孔的膜上需求。切片在六孔板中保持培養(yǎng)堅定不移，培養(yǎng)基為1ml [MEM（Thermo Fisher Scientific, 32360-026）補(bǔ)充25%馬血清（Life Technologies, S-HS-EU-015），25%漢克平衡鹽溶液（Invitrogen, 14025092）真諦所在，1% P/S指導，1% Glutamax（Sigma, 35050-038），1.3%葡萄糖（Sigma, G8644）和1.1% 1M HEPES（Thermo Fisher Scientific, 15630-080）充分，在37°C, 5%的CO2環(huán)境下培養(yǎng)資料。

為了清除巨噬細(xì)胞細(xì)胞廣泛應用，切片在分離后立即用荷蘭Liposoma品牌的氯膦酸鹽鹽脂質(zhì)體clodronateliposomes或空脂質(zhì)體（0.5 mg/ml, LIPOSOMA）處理24小時(shí)。然后通過在切片上方添加4×103 LPS（100 ng/µl, Sigma, 437627, 18小時(shí)）或IL4刺激（20 ng/µl, Peprotech, 214-14, 18小時(shí)）正常型或Ube3a?/? BMDMs的1.5 μl滴液直接補(bǔ)充切片橫向協同，而不接觸切片哪些領域。切片恢復(fù)2天后，采用溶血卵磷脂（0.5 mg/ml, Sigma, 62963）處理切片16小時(shí)以誘導(dǎo)去髓鞘化不斷創新。隨后建立和完善，切片被洗滌并在培養(yǎng)中保持6天，然后進(jìn)行組織學(xué)和生化分析參與水平。

clodronateliposomes體外清除小鼠腦切片巨噬細(xì)胞解決方案：

1. 切片厚度：300μm

2. 濃度：0.5mg/ml

3. 用量：培養(yǎng)基體積1ml大型，清除劑濃度5mg/ml。即每孔1ml培養(yǎng)基加100ul清除劑clodroanteliposomes（Liposoma明確相關要求，C-005）

4. 時(shí)間：24h

clodronateliposomes體外清除小鼠腦切片巨噬細(xì)胞效果檢測：

如圖：巨噬細(xì)胞marker為F4/80重要意義，顯示為紅色。通過荷蘭Liposoma的Clodronateliposomes（C-005）處理后深化涉外，腦切片上的巨噬細(xì)胞幾乎全部清除體系。

論文信息：

論文題目：UBE3A promotes foam cell formation and counters remyelination by targeting ABCA1 for proteasomal degradation

期刊名稱：Nature Communications

時(shí)間期卷：16, Article number: 8077 (2025)

在線時(shí)間：2025年8月29日

DOI：doi.org/10.1038/s41467-025-62053-w

產(chǎn)品信息：

貨號：CP-005-005

規(guī)格：5ml+5ml

品牌：Liposoma

產(chǎn)地：荷蘭

名稱：Clodronate Liposomes and Control Liposomes

辦事處：Target Technology(靶點(diǎn)科技)

Clodronate Liposomes氯膦酸鹽脂質(zhì)體清除泡沫巨噬細(xì)胞，泡沫巨噬細(xì)胞含有過量的細(xì)胞內(nèi)來源于髓鞘的脂質(zhì)開展試點，導(dǎo)致多發(fā)性硬化癥（MS）等神經(jīng)退行性疾病的病理攜手共進。雖然對富含脂質(zhì)的結(jié)構(gòu)，如改良的脂蛋白和髓鞘的攝取推進一步，將巨噬細(xì)胞表型重塑為通常與組織修復(fù)和免疫抑制相關(guān)的表型經過，但這種解決疾病的表型僅是短暫的。我們和其他研究者發(fā)現(xiàn)實際需求，巨噬細(xì)胞中髓鞘來源脂質(zhì)的過度積累解決方案，尤其在衰老過程中優勢，使泡沫細(xì)胞傾向于更具炎癥性和促進(jìn)疾病的表型善謀新篇。這種有害表型的誘導(dǎo)與大腦修復(fù)模型中損傷恢復(fù)受損密切相關(guān)。從機(jī)制上講便利性，細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)的新陳代謝失調(diào)方法，主要由于膽固醇外流減少，導(dǎo)致細(xì)胞脂質(zhì)含量失衡和有害泡沫巨噬細(xì)胞亞群的發(fā)展提供有力支撐。荷蘭Liposoma巨噬細(xì)胞清除劑Clodronate Liposomes見刊于Nature Communications：氯膦酸鹽脂質(zhì)體clodronateliposomes體外清除腦切片Cerebellar brain slices 巨噬細(xì)胞切實把製度。