細胞培養(yǎng)類型可以分為貼壁細胞和懸浮細胞兩種，只有極少數(shù)類型細胞同時存在兩種狀態(tài)。
懸浮細胞是指不需要依賴支持物，可在培養(yǎng)基中以懸浮狀態(tài)生長的一類細胞，如淋巴細胞和大部分血液系統(tǒng)來源細胞交流研討。（如小鼠白血病細胞WEHI-3, 人白血病細胞K-562, HL-60）。工業(yè)上也有越來越多的貼壁傳代細胞被馴化出來高效，進行全懸浮的培養(yǎng)積極影響。目前在工業(yè)中應用的主要有SP2/0、NS0密度增加、CHO有效性、BHK和HEK293細胞等，它們主要用于重組蛋白質(zhì)生產(chǎn)機遇與挑戰；在獸用生物制品中常用的傳代細胞主要有采用全懸浮培養(yǎng)的BHK21細胞廣泛關註、MDCK細胞；及借助微載體懸浮培養(yǎng)的Vero細胞集成技術、PK細胞就能壓製、ST細胞、 Marc145細胞等適應能力，每種細胞的特性都不同更優美。
一般情況下，懸浮細胞相較于貼壁細胞的處理更加簡單一些防控，因為懸浮細胞傳代時無須胰酶消化成效與經驗。但這并不意味著懸浮細胞比貼壁細胞好養(yǎng)，對新手來說堅實基礎，反而更具挑戰(zhàn)性稍有不慎。總是會遇到各種各樣的問題：比如等地，為什么總是出現(xiàn)死細胞和細胞分化最為顯著；說好了傳代很easy的，結果會出現(xiàn)分化規定；養(yǎng)好了凍存復蘇后又出現(xiàn)問題了環境！
養(yǎng)好懸浮細胞，有如下大眾經(jīng)驗分享供給。
要點一：足夠的耐心優勢與挑戰，這是非常必要的
很多懸浮細胞在剛從凍存狀態(tài)復蘇時活力是相對較差的利用好，此時我們需要有足夠的耐心，等待細胞完成自我修復進入對數(shù)增長期解決問題。比如THP-1（人單核細胞白血蚕盗?。慕鈨龅交謴驼Ｔ鲋惩枰?-10天的恢復期；Jurkat相互配合，Clone E6-1(人T淋巴細胞白血病細胞)復蘇后也需要5-7天才能恢復到凍存前的狀態(tài)慢體驗。新手可能會在此期間放棄培養(yǎng)，所以智能化，請多一點耐心哦科技實力！培養(yǎng)這類細胞也是培養(yǎng)耐心的過程呢！
要點二：接種密度的把握
一般來說建設，懸浮細胞接種時密度不應低于50萬個/ML在此基礎上，很多懸浮細胞有密度依賴，密度低導致的不增殖也是新手常見問題之一前來體驗。當然自主研發，有極少數(shù)細胞在密度高時反而狀態(tài)變差，如W6/32（小鼠B細胞雜交瘤細胞）更加廣闊。因此損耗，培養(yǎng)不了解的細胞前查找相關資料去掌握細胞特性非常重要。
要點三：換液方法及頻率
換液頻率不應該被限制得“明明白白"非常完善，細胞是活物性能穩定，在一個連續(xù)培養(yǎng)周期內(nèi)，視細胞生長狀態(tài)可分多次添加補充培養(yǎng)基作用、葡萄糖等特定營養(yǎng)成份情況正常，維持細胞良好的生長狀態(tài)。懸浮培養(yǎng)過程中發揮重要作用，隨著細胞的增殖醒悟，原有培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的消耗，代謝產(chǎn)物的增加高質量，細胞的活率會下降也逐步提升，及時補充營養(yǎng)物質(zhì)，使細胞處于一個相對良好的生存環(huán)境註入了新的力量。切忌頻繁離心換液重要的作用。參考換液方法：
①離心全換液法
即通過離心（800-1000rpm，5min）去除全部舊的培養(yǎng)基去創新，更換新鮮培養(yǎng)基反應能力。該方法適合“皮實“好養(yǎng)的懸浮細胞換液(如K562)，或者當前細胞狀態(tài)良好、密度較高導致培養(yǎng)基消耗較大的情況結構重塑。此方法的優(yōu)點是換液到位聽得懂，能去除部分細胞碎片，但是同樣會對細胞造成一定程度的機械損傷高質量發展。
②離心半換液法
即通過離心（800-1000rpm全方位，5min）50%細胞懸液，更換50%體積的新鮮培養(yǎng)基影響力範圍。該方法適合比較“矯情“難養(yǎng)的細胞（如thp-1）大局，或者正在調(diào)整狀態(tài)中、密度較低但碎片較多需要去除的情況邁出了重要的一步。
③沉降換液法
即不使用離心機而是利用重力自然沉降的方法有序推進，將培養(yǎng)基與細胞分離，達到全部或部分更換新鮮培養(yǎng)基需求。但是其有應用局限性—只適合能成一定大小細胞團（否則無法自然沉降堅定不移，只能低速離心）的細胞，尤其是處理依賴細胞聚集才能增殖的細胞時非常值得推薦真諦所在，如NK-92指導、NK-92 MI、Jurkat充分。該方法能在換液過程中最大限度避免離心過程造成的機械損傷，同時保留聚集的細胞團集聚，并且去除細胞碎片也較為干凈競爭力。
固定懸浮細胞，有如下私房經(jīng)驗分享狀況。
養(yǎng)好懸浮細胞機製性梗阻，需要用化合物等試劑刺激懸浮細胞，或者共培養(yǎng)全過程。使用免疫熒光來檢查懸浮細胞集成應用，一直給很多新手，甚至高手造成心理陰影不負眾望。如何固定好懸浮細胞高效流通？如何確保不掉片？甚至如何讓懸浮細胞貼壁來做實驗重要意義？是很多實驗者的奢望統籌發展。懸浮細胞固定/免疫熒光專用玻片給帶來解決方案。
如下是一些懸浮細胞固定后做的免疫熒光圖片體系，可以參考生產製造。
靶點科技（北京）有限公司
地址：中關村生命科學園北清創(chuàng)意園2-4樓2層
© 2025 版權所有：靶點科技（北京）有限公司 備案號：京ICP備18027329號-2 總訪問量：346712 站點地圖 技術支持：化工儀器網(wǎng) 管理登陸
