肝臟是一個復(fù)雜的器官規劃，由多種細胞類型組成系統。 其中大部分（60-80%）是實質(zhì)細胞——肝細胞。 其余細胞形成異質(zhì)的非實質(zhì)細胞 (NPC) 群，主要由肝內(nèi)皮細胞 (LEC)前沿技術、巨噬細胞（KF），肝星狀細胞 (HSC) 和免疫細胞組成。 肝內(nèi)免疫細胞是 NPC 突出的成分（高達 50%），由 T 細胞（CD8+ 和 CD4+）深入交流、B 細胞、自然殺傷 (NK) 和自然殺傷T (NKT) 細胞加強宣傳、中性粒細胞臺上與臺下、單核細胞和樹突狀細胞 (DC) 和巨噬細胞的各種亞型組成。 肝臟免疫細胞的相對組成因生理條件和物種而異技術發展，例如集聚效應，小鼠肝臟中的 NKT 細胞比人類多。 肝臟免疫細胞組成不同于淋巴器官或血液重要手段，因為肝臟富含 CD4+ T 細胞等形式、NK、NKT 和 γ δ (γδ) T 細胞品率。細胞比例分布參考如下圖。

一般來說不斷發展，肝臟主要是致耐受性器官積極影響，對于預(yù)防對飲食和腸道菌群的炎癥反應(yīng)很重要。 因此緊密協作，NPC 積極促進免疫耐受越來越重要，例如，肝細胞發揮重要作用、枯否細胞 (KC) 和 LEC 誘導(dǎo) T 細胞無反應(yīng)醒悟。 此外，肝竇LEC (LSEC) 產(chǎn)生稱為 LSECtin 的凝集素高質量，可觸發(fā) CD8+ T 細胞耐受也逐步提升。 此外，KC 分泌抗炎細胞因子白細胞介素 10 (IL10) 註入了新的力量，肝臟駐留的 NK 細胞可通過與免疫檢查點通路的相互作用抑制 T 細胞重要的作用。 在某些病理條件下更多可能性，例如感染、炎癥性疾病或癌癥足夠的實力，肝臟免疫細胞的分布或功能可能會發(fā)生變化緊迫性。 這可能導(dǎo)致潛在的不平衡和免疫細胞串?dāng)_的改變。

為了更好地了解影響肝臟的各種病理更適合，需要對常駐/浸潤性免疫群體進行分離高效、免疫表型分析和量化。 目標(biāo)是獲得高產(chǎn)量的單細胞懸液要素配置改革，同時仍保留抗原/表位譜（最小表位降解）并為后續(xù)下游應(yīng)用保留細胞活力體系。為了避免存在于血液中免疫亞群中的肝臟交叉污染，肝臟的原位灌注是通過腔靜脈或門靜脈進行的核心技術體系。 另一個關(guān)鍵步驟是正確處理肝組織開拓創新。 組織解離可以通過機械破壞、使用膠原酶的酶消化或兩種方法的組合來進行必然趨勢。 對于肝臟免疫細胞表型分析促進善治，需要從獲得的勻漿中去除肝細胞，因為它們可能會干擾以后的下游免疫分析多樣性。 可以通過多個離心步驟或通過 Percoll 或 Iodixanol 密度梯度進一步純化細胞懸液發揮效力。 然而，這個過程既費時又費材料真諦所在。 此外指導，純化方法的苛刻條件也可能影響用于任何下游應(yīng)用的細胞的活力和/或功能。

小鼠肝臟灌注方案：

(A) 揭開和拉伸門靜脈以進行灌注充分。 (B) 肝灌注進一步完善。 (C) 漸進式灌注肝臟。 (D) 解離的材料準(zhǔn)備競爭力。 帶有細胞培養(yǎng)基的 C 管調整推進，含解離肝臟的酶。 (E) 肝臟與解離混合物一起放入 C 管中機製性梗阻。 (F) 解離后的肝臟勻漿機製。 (G) 分離組織的濾液。 (H) 基于密度梯度的細胞純化（細胞懸液頂部的碎片去除溶液層集成應用；離心前）探討。 (I) 獲得的細胞被殘留的紅細胞污染。 (J) 去除紅細胞后的最終NPC高效流通。

小鼠肝臟流式檢測Marker方案：

小鼠肝臟巨噬細胞清除方案：

LIPOSOMA的ClodronateLiposomes氯膦酸鹽二鈉脂質(zhì)體（貨號：CP-005-005）清除肝臟巨噬細胞調解製度，頻頻見于Cell，Nature和Science功能。詳細文獻可以聯(lián)系靶點科技技術(shù)支持索取全文創新內容。清除單核巨噬細胞是研究巨噬細胞體內(nèi)功能的重要工具機遇與挑戰。