免疫熒光(IF)是一種利用熒光定位顯色的技術(shù),它不僅能顯示蛋白在細(xì)胞內(nèi)的定位豐富內涵,還能輸出令人驚奇的彩圖損耗。細(xì)胞免疫熒光(IF-IC)需細(xì)胞生長(zhǎng)/固定在玻璃載玻片上進(jìn)行能力建設,在進(jìn)行清洗臺上與臺下、固定帶動產業發展、破膜和染色時(shí)發揮重要作用,細(xì)胞必須附著足夠牢固,否則就會(huì)出現(xiàn)常說(shuō)的掉片問(wèn)題善於監督。貼壁細(xì)胞天然就能固定到支持介質(zhì)上集成技術,但是對(duì)于懸浮細(xì)胞,如何固定牢固更合理?尤其能像貼壁細(xì)胞一樣適應能力,那才是期望的效果。靶點(diǎn)科技給你帶來(lái)懸浮細(xì)胞固定的解決方案有所應。
SHI-FIX玻片, 只為懸浮細(xì)胞固定的解決方案。
懸浮細(xì)胞免疫熒光中的挑戰(zhàn)
由于懸浮細(xì)胞不依賴支持物表面生長(zhǎng)合作關系,其在玻片上的粘附是一大挑戰(zhàn)著力提升。傳統(tǒng)離心甩片或涂片法制備的細(xì)胞片存在細(xì)胞分布不均或固定不牢的問(wèn)題深刻內涵,影響后續(xù)染色和顯微觀察。IF-IC通常不作為懸浮細(xì)胞的檢測(cè)手段融合,這是因?yàn)閼腋〖?xì)胞粘附玻片能力的不足仍是一大難題深入闡釋。
一般貼壁細(xì)胞粘附在包被的玻片上,但懸浮細(xì)胞并不適合完成的事情,在科學(xué)刊物中避免使用懸浮細(xì)胞IF-IC的傾向非常明顯物聯與互聯。但若您研究某個(gè)蛋白在懸浮細(xì)胞中的表達(dá),您能將懸浮細(xì)胞牢固地粘在蓋玻片上IF-IC嗎改造層面?首先供給,您可使用特殊的離心柱和離心機(jī)使細(xì)胞粘附在玻片上。您也可以先對(duì)懸浮細(xì)胞進(jìn)行固定經驗分享、破膜解決方案、染色和清洗,最后將它們粘附在包被玻片上系列。這兩種方法都需復(fù)雜步驟作用,對(duì)于特定細(xì)胞需優(yōu)化條件。如果能讓?xiě)腋〖?xì)胞粘附在玻片上慢體驗,讓它們能像貼壁細(xì)胞一樣IF-IC著力增加,豈不美哉?
Shi-Fix玻片科技實力,只為懸浮細(xì)胞固定免疫熒光
為克服以上挑戰(zhàn)處理,Shikhar Biotech開(kāi)發(fā)出專門的懸浮細(xì)胞免疫熒光專用Shi-fix™玻片,您只需添加懸浮細(xì)胞勃勃生機、無(wú)需離心即可將細(xì)胞牢固地粘附在玻片助力各業,后續(xù)可對(duì)粘附細(xì)胞進(jìn)行特定刺激。懸浮細(xì)胞可在玻片上單層/分層生長(zhǎng)提供有力支撐,后續(xù)可像貼壁細(xì)胞般進(jìn)行IF-IC應用,顯著簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)流程并提高染色效率。
Shi-fix™ plus玻片比Shi-fix™玻片具有更強(qiáng)的吸附力品率,若您的臨床樣本中懸浮細(xì)胞量少相貫通,可考慮搭配Shi-fix™ plus玻片!
Shi-Fix玻片實(shí)驗(yàn)操作具體步驟
1. 用PBS清洗收集的懸浮細(xì)胞積極影響,并用PBS將其重懸為2~5×106/mL濃度的細(xì)胞懸液自動化方案;
2. 為便于操作,將Shi-fix™玻片放在12孔板中越來越重要。將細(xì)胞懸液滴加Shi-fix™玻片上(2~3×105個(gè)細(xì)胞/玻片)線上線下;
3. 將含Shi-fix™玻片的12孔板放在水平臺(tái)面上,室溫靜置讓細(xì)胞附著20~30分鐘(對(duì)于某些類型的細(xì)胞,孵育時(shí)間越長(zhǎng)附著效果越好數據顯示,但不要超過(guò)1小時(shí))高質量;
4. 向含Shi-fix™玻片的12孔板兩側(cè)邊緣加入0.5 mL PBS(不可直接滴到玻片),輕柔搖動(dòng)3~5分鐘清洗未粘附的細(xì)胞(可放置水平搖床上緩慢搖動(dòng))記得牢。
5. 顯微鏡檢查細(xì)胞附著情況註入了新的力量。如需進(jìn)一步培養(yǎng),加入1mL培養(yǎng)基更多可能性;或者直接進(jìn)行固定去創新、破膜和免疫熒光染色。
Shi-Fix玻片固定懸浮細(xì)胞結(jié)果圖
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