免疫熒光(IF)是一種利用熒光定位顯色的技術(shù),它不僅能顯示蛋白在細(xì)胞內(nèi)的定位線上線下,還能輸出令人驚奇的彩圖廣泛關註。細(xì)胞免疫熒光(IF-IC)需細(xì)胞生長(zhǎng)/固定在玻璃載玻片上進(jìn)行,在進(jìn)行清洗聯動、固定共享應用、破膜和染色時(shí)協調機製,細(xì)胞必須附著足夠牢固,否則就會(huì)出現(xiàn)常說的掉片問題。貼壁細(xì)胞天然就能固定到支持介質(zhì)上改革創新,但是對(duì)于懸浮細(xì)胞知識和技能,如何固定牢固?尤其能像貼壁細(xì)胞一樣高效利用,那才是期望的效果特征更加明顯。靶點(diǎn)科技給你帶來懸浮細(xì)胞固定的解決方案。
SHI-FIX玻片, 只為懸浮細(xì)胞固定的解決方案講理論。
懸浮細(xì)胞免疫熒光中的挑戰(zhàn)
由于懸浮細(xì)胞不依賴支持物表面生長(zhǎng)的可能性,其在玻片上的粘附是一大挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)離心甩片或涂片法制備的細(xì)胞片存在細(xì)胞分布不均或固定不牢的問題服務為一體,影響后續(xù)染色和顯微觀察問題。IF-IC通常不作為懸浮細(xì)胞的檢測(cè)手段,這是因?yàn)閼腋〖?xì)胞粘附玻片能力的不足仍是一大難題全會精神。
一般貼壁細(xì)胞粘附在包被的玻片上系統穩定性,但懸浮細(xì)胞并不適合,在科學(xué)刊物中避免使用懸浮細(xì)胞IF-IC的傾向非常明顯集中展示。但若您研究某個(gè)蛋白在懸浮細(xì)胞中的表達(dá)實力增強,您能將懸浮細(xì)胞牢固地粘在蓋玻片上IF-IC嗎?首先探索創新,您可使用特殊的離心柱和離心機(jī)使細(xì)胞粘附在玻片上帶來全新智能。您也可以先對(duì)懸浮細(xì)胞進(jìn)行固定、破膜新產品、染色和清洗去完善,最后將它們粘附在包被玻片上。這兩種方法都需復(fù)雜步驟長遠所需,對(duì)于特定細(xì)胞需優(yōu)化條件求索。如果能讓懸浮細(xì)胞粘附在玻片上,讓它們能像貼壁細(xì)胞一樣IF-IC規模,豈不美哉穩定發展?
Shi-Fix玻片,只為懸浮細(xì)胞固定免疫熒光
為克服以上挑戰(zhàn)聯動,Shikhar Biotech開發(fā)出專門的懸浮細(xì)胞免疫熒光專用Shi-fix™玻片增持能力,您只需添加懸浮細(xì)胞、無需離心即可將細(xì)胞牢固地粘附在玻片事關全面,后續(xù)可對(duì)粘附細(xì)胞進(jìn)行特定刺激表現明顯更佳。懸浮細(xì)胞可在玻片上單層/分層生長(zhǎng)狀態,后續(xù)可像貼壁細(xì)胞般進(jìn)行IF-IC技術節能,顯著簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)流程并提高染色效率。
Shi-fix™ plus玻片比Shi-fix™玻片具有更強(qiáng)的吸附力廣泛認同,若您的臨床樣本中懸浮細(xì)胞量少國際要求,可考慮搭配Shi-fix™ plus玻片流動性!
Shi-Fix玻片實(shí)驗(yàn)操作具體步驟
1. 用PBS清洗收集的懸浮細(xì)胞,并用PBS將其重懸為2~5×106/mL濃度的細(xì)胞懸液競爭激烈;
2. 為便于操作持續創新,將Shi-fix™玻片放在12孔板中。將細(xì)胞懸液滴加Shi-fix™玻片上(2~3×105個(gè)細(xì)胞/玻片)空白區;
3. 將含Shi-fix™玻片的12孔板放在水平臺(tái)面上協調機製,室溫靜置讓細(xì)胞附著20~30分鐘(對(duì)于某些類型的細(xì)胞,孵育時(shí)間越長(zhǎng)附著效果越好形勢,但不要超過1小時(shí))實踐者;
4. 向含Shi-fix™玻片的12孔板兩側(cè)邊緣加入0.5 mL PBS(不可直接滴到玻片),輕柔搖動(dòng)3~5分鐘清洗未粘附的細(xì)胞(可放置水平搖床上緩慢搖動(dòng))約定管轄。
5. 顯微鏡檢查細(xì)胞附著情況數據。如需進(jìn)一步培養(yǎng),加入1mL培養(yǎng)基發揮;或者直接進(jìn)行固定顯著、破膜和免疫熒光染色。
Shi-Fix玻片固定懸浮細(xì)胞結(jié)果圖
Shi-Fix玻片(Biotarget)訂購信息
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