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懸浮細(xì)胞免疫熒光專(zhuān)用玻片使用解決方案文獻(xiàn)參考

更新時(shí)間:2024-12-15   點(diǎn)擊次數(shù):570次

懸浮細(xì)胞免疫熒光的挑戰(zhàn)

免疫熒光(IF)技術(shù)基于抗原-抗體反應(yīng)的原理覆蓋範圍,利用熒光標(biāo)記抗體檢測(cè)和定位細(xì)胞或組織中的特定抗原優勢領先。細(xì)胞免疫熒光(IF-IC)以細(xì)胞為樣本、細(xì)胞需牢固地生長(zhǎng)/附著在玻片上,防止細(xì)胞在后續(xù)清洗保供、固定、破膜和染色時(shí)丟失。貼壁細(xì)胞能粘附生長(zhǎng)在包被玻片上,滿(mǎn)足IF-IC所需結(jié)合力技術創新;但懸浮細(xì)胞不具備粘附固體表面能力,傳統(tǒng)離心甩片或涂片法制備的細(xì)胞片存在細(xì)胞分布不均重要作用、固定不牢導(dǎo)致后續(xù)細(xì)胞丟失的問(wèn)題持續向好,影響后續(xù)染色和顯微觀察。靶點(diǎn)科技懸浮細(xì)胞免疫熒光專(zhuān)用玻片充足,作為這一痛點(diǎn)的解決方案進展情況,可以像貼壁細(xì)胞一樣處理懸浮細(xì)胞。

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Shi-fix玻片

解決懸浮細(xì)胞免疫熒光中的難題

懸浮細(xì)胞免疫熒光專(zhuān)用Shi-fix玻片方案,可牢固地吸附懸浮細(xì)胞應用的選擇、后續(xù)可像“貼壁細(xì)胞"一樣完成IF-IC十大行動,在獲得更好結(jié)果的同時(shí)左右,能顯著簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)流程、提高實(shí)驗(yàn)效率綜合措施,同時(shí)還節(jié)省經(jīng)費(fèi)可靠保障。


Shi-fixplus玻片

滿(mǎn)足低細(xì)胞量的懸浮細(xì)胞免疫熒光需求

在實(shí)際應(yīng)用中,或許會(huì)遇到細(xì)胞數(shù)量少的特殊樣本現場,運(yùn)用Shi-fix™玻片可能達(dá)不到理想的IF-IC效果高端化。為此Shikhar Biotech在Shi-fix™玻片基礎(chǔ)上升級(jí)出增強(qiáng)型Shi-fix™ plus玻片(具有更強(qiáng)的懸浮細(xì)胞吸附性),解決低數(shù)量懸浮細(xì)胞樣本的IF-IC煩惱我有所應!同時(shí)提單產,plus適合培養(yǎng),為刺激實(shí)驗(yàn)提供了選擇至關重要。


使用Shi-fix™玻片發(fā)表的文獻(xiàn)有哪些發展空間?用Shi-fix™玻片做了哪些實(shí)驗(yàn)?

1.在Google Patents的Method of treatment上發(fā)表的Therapeutic and prophylactic applications of cell penetrating, anti-DNA binding proteins, in particular in the context of inflammatory disease and complications (International Patent WO2023034778A1)中有所應,涉及細(xì)胞穿透性抗DNA結(jié)合蛋白的治療和預(yù)防應(yīng)用足了準備,特別是在炎癥性疾病及其并發(fā)癥方面的應(yīng)用合作關系,申請(qǐng)者使用Shi-fix™玻片培養(yǎng)PLB-985細(xì)胞使其貼壁,進(jìn)行堿性磷酸酶和DAPI染色深刻內涵。

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2.Chang等人開(kāi)發(fā)出一種IL-10結(jié)合區(qū)的20個(gè)氨基酸的多肽(NK20a)傳遞,它對(duì)B細(xì)胞淋巴瘤具有抗腫瘤作用,并能消除IL-10對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用深入闡釋。進(jìn)一步將NK20a與納米金顆粒(負(fù)載化療藥物5-FU)偶聯(lián)相關性,增強(qiáng)了5-FU對(duì)乳腺癌細(xì)胞株BT-474的抗腫瘤效應(yīng)。


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作者在其中借助Shi-fix™玻片驗(yàn)證了NK20a與納米金顆粒(負(fù)載化療藥物5-FU)偶聯(lián)物在B細(xì)胞中藥物遞送的可行性物聯與互聯,細(xì)胞核(DAPI可以使用,藍(lán)色)、細(xì)胞膜(Cytopainter紮實,紅色)效高化、FITC(NK20a, 綠色)。


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3.Portelinha等人報(bào)告了一種Polo-like激酶4與BCL-2抑制劑的治療組合投入力度,它能引發(fā)侵襲性淋巴瘤的基因組不穩(wěn)定性和細(xì)胞死亡創造。

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其中,作者先用Shi-fix玻片吸附OCI-Ly19細(xì)胞貢獻法治,然后免疫熒光染色設備製造,驗(yàn)證不同劑量CFI對(duì)細(xì)胞中心體數(shù)量的影響。細(xì)胞核(DAPI攻堅克難,藍(lán)色)管理、pericentrin(紅色)、CEP110(綠色)雙向互動。

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作者后續(xù)又用Shi-fix玻片吸附HBL-1細(xì)胞合作,免疫熒光染色驗(yàn)證CFI或Ven及聯(lián)合對(duì)細(xì)胞中心體的影響。細(xì)胞核(DAPI助力各業,藍(lán)色)極致用戶體驗、pericentrin(紅色)。

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4.Chen等人評(píng)估干擾DDR的核穿透性抗DNA自身抗體對(duì)活化的人粒細(xì)胞樣分化PLB-985細(xì)胞和從C57BL/6小鼠中分離出來(lái)的中性粒細(xì)胞解聚應用、釋放DNA和NETs的影響建議。

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作者用Shi-fix玻片吸附PLB-985細(xì)胞驗(yàn)證DX1的穿透性(AP酶顯色系統(tǒng))。

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后續(xù)用DAPI(藍(lán)色)和SYTOX Green(綠色)染色吸附于Shi-fix玻片上的PLB-985細(xì)胞相貫通,發(fā)現(xiàn)DX1可抑制PMA刺激分化PLB-985細(xì)胞的染色質(zhì)解聚和DNA釋放不斷發展。


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5.Yao等人研究證實(shí)人胃癌組織中NK細(xì)胞水平與CAFs數(shù)量成反比,CAFs通過(guò)誘導(dǎo)鐵死亡(鐵依賴(lài)性脂質(zhì)過(guò)氧化物積累)損害NK的抗腫瘤能力自動化方案。CAFs通過(guò)促進(jìn)鐵超載誘導(dǎo)NK鐵死亡緊密協作,細(xì)胞內(nèi)鐵水平降低則能保護(hù)NK免受CAFs誘導(dǎo)鐵死亡的影響。

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作者在研究中借助Shi-fix玻片對(duì)正常pb-NK(外周血NK)和共孵育CAFs的pb-NK染色FerroOrange互動講,判斷細(xì)胞中“鐵池"中鐵含量穩定性。

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6.研究人員將Phe和CHex修飾樹(shù)枝狀聚合物用于T細(xì)胞的pH敏感藥物遞送系統(tǒng)像一棵樹。樹(shù)枝狀聚合物通過(guò)內(nèi)吞被內(nèi)化到T細(xì)胞中,在弱酸(pH 6.5)下去突破,細(xì)胞對(duì)其攝取能力增強(qiáng)能運用。研究證實(shí)Phe和CHex修飾樹(shù)枝狀聚合物具有向T細(xì)胞及其亞群遞送的潛能,可用于腫瘤免疫療法智能設備。

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研究者借助Shi-fix玻片完成對(duì)Jurkat細(xì)胞的免疫熒光染色不可缺少,證實(shí)PAMAM-Phe-CHex和 PAMAM-CHex-Phe與CD3-PE染色T細(xì)胞相關(guān)。細(xì)胞核(DAPI特點,藍(lán)色)積極回應、Phe/CHex修飾樹(shù)枝狀聚合物(FITC,綠色)又進了一步、溶酶體(紅色)多種場景。


7.在2021年巴塞羅那大學(xué)醫(yī)學(xué)院發(fā)布的Genetic Disruption of Transfer RNA Modifications in Human Cancer的博士論文中,為使細(xì)胞吸附更加牢固規劃,作者借助Shi-fix玻片完成NCI-H82擴大公共數據、DMS-273和HCC-33細(xì)胞的免疫熒光染色。

8.Whiteaker等人開(kāi)發(fā)的51重檢測(cè)方法(DDR-2)帶動擴大,可量化蛋白質(zhì)表達(dá)和DNA損傷反應(yīng)磷酸化核心技術體系。該方法可對(duì)永生化淋巴母細(xì)胞系和原代人類(lèi)外周血單核細(xì)胞中電離輻射誘導(dǎo)的DNA損傷后的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)進(jìn)行量化,鑒定抑制ATM的PD生物標(biāo)記物核心技術,為臨床前和臨床研究提供支持應用提升。

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研究者借助Shi-fixcoated 96-well microplate先后多次對(duì)LCL57細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光染色。


9.Kandil等人開(kāi)發(fā)出新型升級(jí)版siRNA運(yùn)送系統(tǒng)(Tf-PEI多聚物)創造性,它不僅能通過(guò)受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用將有效載荷特異性運(yùn)送至所需的靶細(xì)胞發展的關鍵,還能增強(qiáng)從內(nèi)泌體囊泡中的釋放,從而在細(xì)胞質(zhì)中啟動(dòng)RNAi保障性。

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作者在驗(yàn)證Jurkat細(xì)胞中siRNA溶酶體釋放染色時(shí)帶動產業發展,用Shi-fix玻片來(lái)固定吸附Jurkat細(xì)胞責任製。AF488-siRNA(綠色)十分落實、溶酶體(紅色)、細(xì)胞核(DAPI規則製定,藍(lán)色)製造業。

10.論文報(bào)道一種合成的標(biāo)記熒光生長(zhǎng)抑素類(lèi)似物——67/68Ga-MMC(IR800)-TOC,在體內(nèi)和體外的宏觀關規定、中觀和微觀尺度上都觀察到了受體介導(dǎo)的吸收發展基礎。胰腺NET患者的手術(shù)生物樣本也顯示出受體特異性的藥劑結(jié)合,可清晰地劃分出與病理結(jié)果相匹配的腫瘤邊界建強保護。

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在驗(yàn)證細(xì)胞對(duì)Ga-MMC(IR800)-TOC的結(jié)合和內(nèi)化實(shí)驗(yàn)中同期,作者先用Shi-fix玻片分別吸附HCT116-SSTR2生產效率、NCI-H69和HCT116-WT細(xì)胞,與5 µM Ga-MMC(IR800)-TOC(紅色)孵育1小時(shí)后染色細(xì)胞核(綠色)效果,最后用共聚焦顯微鏡圖像使用。


使用Shi-fix™玻片部分驗(yàn)證細(xì)胞結(jié)果展示圖


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