氯膦酸二鈉脂質(zhì)體Clodronate Liposomes是相對于抗體核心技術，基因敲除小鼠等手段而言目前來說成熟（Nico Van Rooijen教授90年代開發(fā)和后期荷蘭liposoma公司商業(yè)化生產(chǎn)）先進技術，可靠高產，經(jīng)濟且廣泛使用的一種有效的巨噬細胞清除工具。脂質(zhì)體包裹氯膦酸鹽通常用于清除巨噬細胞群切實把製度，因為它一旦被巨噬細胞吞噬保持競爭優勢，然后被溶酶體酶消化協調機製，游離氯膦酸鹽在細胞質(zhì)內(nèi)積累好宣講，當濃度超過一定閾值時就會產(chǎn)生功能上不可逆的抑制和細胞凋亡。由于氯膦酸鹽在血液中的半衰期只有幾分鐘技術創新，游離的氯膦酸鹽會被腎臟迅速清除處理方法。借助腹腔，尾靜脈等多種給藥方式實現(xiàn)不同組織部位中巨噬細胞的清除持續向好。荷蘭liposoma是目前Cell習慣，Nature和Science頂刊發(fā)表的用于體內(nèi)/體外巨噬細胞清除的氯磷酸二鈉脂質(zhì)體/氯膦酸鹽脂質(zhì)體。
對于腦部巨噬細胞進展情況，可以參考我們之前的文章的積極性，有專門介紹腦各種類型巨噬細胞的。常駐小膠質(zhì)細胞與血管周圍和腦膜巨噬細胞一起由胚胎卵黃囊前體產(chǎn)生應用的選擇，占所有腦細胞的10%十大行動。氯膦酸鹽脂質(zhì)體通過腦內(nèi)或腦室注射給藥左右，主要是掌握腦立體定位注射背景下，可以定點清除海馬，下丘腦等部位巨噬細胞可靠保障。北京腦科學與類腦研究所利用荷蘭liposoma的氯膦酸鹽脂質(zhì)體Clodronate Liposomes清除下丘腦巨噬細胞的文獻可以聯(lián)系我們索取自然條件。
腦巨噬細胞清除參考模型一
動物模型：C57BL/6J小鼠，使用海馬切片培養(yǎng)直接研究小膠質(zhì)細胞
巨噬細胞清除方法：在體外試驗天數(shù)的第0天和第3天，在培養(yǎng)基中加入0.05 mg/mL Clophosome-A 培養(yǎng)24小時互動互補。對照組給予等量陰離子脂質(zhì)體對照加入到培養(yǎng)基中發揮重要帶動作用。處理后，切片用加熱的PBS仔細沖洗三次意料之外，并用新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)文化價值。
巨噬細胞清除結(jié)果：
在氯膦酸處理的培養(yǎng)物中，小膠質(zhì)細胞被顯著去除(圖A, 3)置之不顧，而氯膦酸鈉對神經(jīng)元密度無影響
腦巨噬細胞清除參考模型二
動物模型：C57BL/6J小鼠
巨噬細胞清除方法：立體定位注射10ul
巨噬細胞清除結(jié)果：
腦室內(nèi)的氯膦酸鈉導致血管周圍CD206陽性巨噬細胞的清除不斷完善，但不影響小膠質(zhì)細胞(P2Y12R標記，綠色)方便。用內(nèi)皮標記物番茄凝集素(藍色)觀察血管基礎上。
腦巨噬細胞清除參考模型三
動物模型：C57BL/6雄性小鼠(8 ~ 10周齡，23 ~ 25 g)應用領域；C57BL/6背景Cx3cr1GFP/+小鼠(雄性保持競爭優勢，8 ~ 10周齡，23-25 g)
巨噬細胞清除方法：
Cx3cr1GFP/+小鼠和C57BL/6小鼠發展機遇，將1 μL的Liposomes 或1 μL的對照Dil-Lip注射到左紋狀體(距囟門前方0.8毫米長效機製，外側(cè)2.0毫米，深度為3.0毫米)
巨噬細胞清除結(jié)果：
A.
注射Clodronate liposomes于24小時開始在腦實質(zhì)中消耗小膠質(zhì)細胞穩定，注射1 μL Dil-Lip后第1天的一系列腦切片（脂質(zhì)體用紅色熒光染料Dil標記）進入紋狀體（圖A第一排）或腦側(cè)室（圖A第二排）
代表性圖像顯示進入當下，紋狀體注射 Dil-Lip或Clodronate liposomes后不同時間點Cx3cr1-GFP+小膠質(zhì)細胞（綠色）的耗竭。（圖A第三效高化、四排）顯示放大后的小膠質(zhì)細胞圖像新體系。
B.
注射1 μL Clodronate liposomes后紋狀體Cx3cr1-GFP+細胞的量化數(shù)據(jù)（圖B）。
C.
在Clodronate liposomes注射后的第1創造、4不難發現、7天，用流式細胞術(shù)分析Cx3cr1-GFP+小膠質(zhì)細胞設備製造。圖中顯示了代表性的點圖發展需要，并顯示了紋狀體細胞群中Cx3cr1-GFP+的百分比。紅色：Cx3cr1-GFP?細胞群管理；綠色：Cx3cr1-GFP+細胞群（圖C）顯示。
D.
圖表顯示注射Clodronate liposomes后紋狀體和皮層中剩余Cx3cr1-GFP+種群的百分比（圖D）。
腦巨噬細胞清除參考模型四
巨噬細胞清除方法：海馬切片培養(yǎng)中加入氯膦酸脂質(zhì)體體外18天效率和安，濃度0.5 mg/mL（氯膦酸共500 µg）設計能力，24小時后，用培養(yǎng)基輕輕洗滌培養(yǎng)物深入開展，并給予另一劑量的0.5 mg/mL氯膦酸脂質(zhì)體更為一致，再孵育24小時，此時再次洗滌培養(yǎng)物，置于新培養(yǎng)基中研究與應用，孵育7天飛躍。第7天，培養(yǎng)的小膠質(zhì)細胞耗盡全面協議，準備進行后續(xù)實驗重要部署。
巨噬細胞清除結(jié)果：
小膠質(zhì)細胞、星形膠質(zhì)細胞工具、少突膠質(zhì)細胞和神經(jīng)元的代表性細胞特異性標記染色（Iba1的過程中，
GFAP, CNPase和NeuN）分別顯示與對照組（第一排）相比氯膦酸脂質(zhì)體處理（第二排）的切片小膠質(zhì)細胞耗竭，且對其他細胞類型沒有影響（比例尺廣泛關註，20毫米）促進進步。
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