品牌：Virogen

貨號(hào)：101-A

名稱：ANTI-GLUTATHIONE MAB 100

代理：靶點(diǎn)科技

論文題目：Glutathione adducts induced by ischemia and deletion of glutaredoxin-1 stabilize HIF-1α and improve limb revascularization

期刊：PNAS. May 9, 2016. 113 (21) 6011-6016

摘要：谷胱甘肽 （GSH）-蛋白加合物是被戊二醇-1 （Glrx） 逆轉(zhuǎn)的氧化翻譯后修飾重要手段。我們發(fā)現(xiàn)缺血誘導(dǎo)的氧化劑通過缺氧誘導(dǎo)因子 （HIF）-1α（一種血管生成轉(zhuǎn)錄因子）上的 GSH 加合物促進(jìn)血運(yùn)重建相關。Cys520 上的 GSH 加合物穩(wěn)定 HIF-1α 蛋白探索，Glrx 的耗竭在體外穩(wěn)定 HIF-1α 并增加血管生成基因表達(dá)。體內(nèi) Glrx 消融可增加小鼠股動(dòng)脈結(jié)扎后缺血肌中的 GSH 加合物效果，并改善與 HIF-1α 和 VEGF 表達(dá)增加相關(guān)的血流恢復(fù)形式。因此競爭力所在，缺血肢體中 HIF-1α 上 GSH 蛋白加合物的增加有利于促進(jìn)血管生成系統。我們的數(shù)據(jù)表明，HIF-1α是Glrx的新型體內(nèi)靶點(diǎn)空白區，抑制Glrx是改善缺血性肢體血運(yùn)重建的潛在治療策略協調機製。

研究背景：

缺血組織中的活性氧（ROS）增加，是血運(yùn)重建所必需的;然而形勢，其機(jī)制仍不清楚實踐者。在谷胱甘肽 （GSH） 存在下，半胱氨酸殘基暴露于 ROS 會(huì)產(chǎn)生 GSH 蛋白加合物約定管轄，這些加合物被胞質(zhì)硫醇轉(zhuǎn)移酶谷肓高蛋白-1 （Glrx） 特異性逆轉(zhuǎn)數據。在這里，我們表明一個(gè)關(guān)鍵的血管生成轉(zhuǎn)錄因子缺氧誘導(dǎo)因子 （HIF）-1α 通過 GSH 加合物穩(wěn)定業務指導，并且 Glrx 的基因缺失改善了缺血性血運(yùn)重建改進措施。在小鼠肌肉 C2C12 細(xì)胞中，HIF-1α 蛋白水平通過增加具有細(xì)胞滲透性氧化 GSH （GSSG-乙酯） 或 2-乙酰氨基-3-[4-（2-乙酰氨基-2-羧基乙基磺酰硫基氨基）苯硫基氨基甲酰硫基]丙酸 （2-AAPA） 增加 HIF-1α 蛋白水平長足發展，丙酸是谷胱甘肽還原酶的抑制劑今年。生物素開關(guān)測(cè)定顯示 GSSG 酯誘導(dǎo)的 HIF-1α 含有可逆修飾的硫醇，并且 MS 證實(shí)了 Cys520（小鼠 Cys533）上的 GSH 加合物結構不合理。此外動手能力，HIF-1α Cys520 絲氨酸突變體對(duì) 2-AAPA 誘導(dǎo)的 HIF-1α 穩(wěn)定具有抗性。此外意見征詢，Glrx 過表達(dá)會(huì)阻止 HIF-1α 穩(wěn)定提升，而 siRNA 的 Glrx 消融會(huì)增加 HIF-1α 蛋白和下游血管生成基因的表達(dá)。Glrx KO小鼠股動(dòng)脈結(jié)扎后的血流恢復(fù)顯著改善等多個領域，這與缺血肌中GSH蛋白加合物再獲，毛細(xì)血管密度產品和服務，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）-A和HIF-1α水平升高有關(guān)。因此體驗區，Glrx 消融通過增加 Cys520 上的 GSH 加合物來(lái)穩(wěn)定 HIF-1α增多，從而促進(jìn)體內(nèi) HIF-1α 穩(wěn)定、VEGF-A 產(chǎn)生和缺血性肌肉血運(yùn)重建有望。

盡管人們認(rèn)為增加氧化劑是有害的進一步推進，但抗氧化療法的臨床試驗(yàn)未能預(yù)防心血管疾病。在小鼠模型中方案，活性氧 （ROS） 減少會(huì)損害后肢缺血后的缺血性血運(yùn)重建應用的選擇，相反，增加ROS或減少抗氧化劑可改善缺血性血運(yùn)重建左右。因此背景下，ROS在缺血血運(yùn)重建中起保護(hù)作用。然而傳承，人們對(duì)ROS改善缺血性血運(yùn)重建的分子機(jī)制知之甚少等特點。

人們普遍認(rèn)為建言直達，ROS 通過半胱氨酸硫醇 （-SH） 的翻譯后修飾來(lái)改變蛋白功能多種。蛋白質(zhì)硫醇易受氧化影響，并產(chǎn)生可逆氧化修飾充分發揮，包括 S-亞磺醢l展成就；?（-SOH）、S-亞硝基化 （-SNO） 和谷胱甘肽 （GSH）-蛋白加合物 [S-谷胱甘肽化 （-SSG）] 重要方式。這些可逆修飾可以調(diào)節(jié)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)開展面對面，并可能有助于 ROS 誘導(dǎo)的缺血性血運(yùn)重建。有趣的是非常重要，S-亞硝基化已被證明是一氧化氮 （NO） 介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制進一步提升，并被證明可以穩(wěn)定缺氧誘導(dǎo)因子 （HIF）-1α，這是一種主要的血管生成轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子營造一處。

S-亞硝基化和 S-亞磺醺母飫撔?；诨瘜W(xué)上不穩(wěn)定，并進(jìn)一步與 GSH 反應(yīng)取得顯著成效，GSH 是富含的小細(xì)胞內(nèi)硫醇新模式，形成 GSH 加合物。胞質(zhì)硫醇轉(zhuǎn)移酶戊二醇轉(zhuǎn)移酶戊二醇-1 （Glrx） 特異性且有效地催化 GSH 蛋白加合物的還原;因此規劃，Glrx 調(diào)節(jié)的 GSH 蛋白加合物可影響氧化還原信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)提高，并在病理生理?xiàng)l件下發(fā)揮重要作用。潛在的體內(nèi)靶蛋白的 GSH 蛋白加合物在缺血性血運(yùn)重建中的作用尚未闡明進入當下。我們發(fā)現(xiàn) Glrx 過表達(dá)會(huì)損害小鼠缺血性血運(yùn)重建 紮實。在這里效高化，我們假設(shè) GSH 蛋白加合物可以阻止 HIF-1α 的降解，并且 Glrx 可能通過逆轉(zhuǎn) GSH 加合物來(lái)控制 HIF-1α 活性投入力度。我們證明發展機遇，由于缺血或Glrx耗竭，HIF-1α通過Cys520上的GSH加合物穩(wěn)定法治力量。 與此一致全技術方案，Glrx KO小鼠改善了缺血性肢體血運(yùn)重建。