懸浮細(xì)胞總是在孵抗體和洗的時候被沖掉，懸浮細(xì)胞做免疫熒光怎么固定各領域？

傳統(tǒng)方法

實(shí)驗(yàn)步驟：

1. 細(xì)胞在冰浴中冷卻共謀發展，然后用臺式離心機(jī)于4℃以800 g 離心5 min統籌發展，吸去培養(yǎng)液并以4℃PBS重懸細(xì)胞性能。

2. 離心吸去PBS，以1~2 ml 2%PFA固定液統籌推進，或2%PFA固定液/0.1% Triton X-100重懸細(xì)胞方案，置冰上固定30 min。

3. 離心了解情況、吸去固定液深入，用15 ml 4℃ PBS重懸細(xì)胞，放5 min 后重要的，用PBS再次洗滌細(xì)胞開展研究。

4. 稀釋的第一抗體于4℃用微量離心機(jī)以13 500 g 離心2 min，250 μl 抗體足夠用于5x106細(xì)胞相互融合。

5. 離心細(xì)胞質生產力，吸去PBS，重懸細(xì)胞于第一抗體中技術交流，置4℃溫育1 h。

6. 用4℃ PBS稀釋細(xì)胞和抗體至15 ml拓展。

7. 離心創造更多，吸去PBS宣講活動，以4℃ PBS重懸細(xì)胞，重復(fù)1次工藝技術。

8. 第二抗體4℃用微量離心機(jī)以13 500 g 離心2 min效率，5x106細(xì)胞用250 ul 抗體足夠。

9. 吸去PBS近年來，以第二抗體重懸細(xì)胞講道理，4℃溫育1 h，重復(fù)步驟6及步驟7技術先進。

10. 除非立即觀察細(xì)胞更多的合作機會，否則在進(jìn)行細(xì)胞濃縮的下一步操作之前應(yīng)以鋁萡包裹離心管并冷藏。

11. 離心細(xì)胞并以少量PBS重懸（勿用水）認為，將細(xì)胞懸液滴于多聚-L-賴氨酸覆層的載玻片上服務好，加上蓋玻片，盡可能馬上觀察結(jié)果長效機製。 

鏡下觀察：沒有細(xì)胞講實踐，原來掉片了！^戰不懈∈袌鲩_拓！

靶點(diǎn)科技Shi-Fix懸浮細(xì)胞固定免疫熒光專用玻片，帶來痛點(diǎn)解決方案大大縮短。像貼壁細(xì)胞一樣處理懸浮細(xì)胞要落實好，好簡單啊，就四步越來越重要的位置！