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巨噬細胞清除各種方法對比-仍以Clodronate Liposomes為主

更新時間:2023-07-26   點擊次數(shù):2278次

巨噬細胞(Macrophages)是先天性免疫系統(tǒng)的重要組成細胞之一搖籃,作為機體第一道防線開展攻關合作,具有促進損傷愈合、產(chǎn)生活性氧物質和吞噬異物的作用,其功能異持Ω餍??梢饳C體免疫反應失調(diào)或組織病理性損傷。巨噬細胞有組織駐留型和非組織駐留型(招募)兩種細胞群體。巨噬細胞的另一特征是能夠表達特定的細胞表面標志物如F4/80、CD68將進一步、iNOS和CD206等。非組織駐留的巨噬細胞主要分布于循環(huán)系統(tǒng)內(nèi)發展成就,而駐留型巨噬細胞則主要存在于各個組織器官中成就,如神經(jīng)系統(tǒng)的小膠質細胞、肝臟Kupffer細胞開展面對面、皮膚朗格漢斯細胞和腹腔的巨噬細胞等系統。巨噬細胞的分化、增殖和極化依賴于特定的生長因子及其受體進一步提升。巨噬細胞的表型受到其周圍微環(huán)境的影響空間廣闊,目前已鑒定出兩類極化表型的巨噬細胞:M1和M2表型細胞。M1表型細胞改革創新,也被稱為經(jīng)典激活的巨噬細胞知識和技能,表達iNOS,釋放促炎細胞因子高效利用,如TNFα特征更加明顯、IL-1b估算、IL-6和IL-12講理論;而M2型巨噬細胞,即交替激活的巨噬細胞不要畏懼,表達CD206和Arg-1服務為一體,負責釋放抗炎細胞因子,如IL-10逐漸顯現。M1和M2巨噬細胞更多是體外用于簡化研究的誘導模型狀態(tài)全會精神。對于體內(nèi),更多是兩種狀態(tài)或者混合的多種狀態(tài)長效機製。這正是巨噬細胞作為損失和修復法治力量,為維持穩(wěn)態(tài)的功能體現(xiàn)。


巨噬細胞表型與功能活性的這種多樣性和復雜性分享,使得巨噬細胞的體內(nèi)生物學研究存在一定困難共享。為解決這一問題信息化,近年采用了一種稱為巨噬細胞耗竭的方法來進行研究。巨噬細胞耗竭實際上是一種采用理化或遺傳學技術將巨噬細胞去除的方法生動。這種方法現(xiàn)已廣泛用于研究巨噬細胞在動物疾病模型中的作用和免疫病理或炎癥損傷機制新型儲能,也開始用于某些疾病模型如移植排異、腸腫瘤和心功能不全等的治療研究新品技。

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近年應用較多的幾種巨噬細胞耗竭方法範圍。

1.氯膦酸二鈉脂質體法:Clodronate Liposomes。以荷蘭Lipsoma的產(chǎn)品頻頻見于Cell紮實做,Nature和Science空間廣闊,貨號CP-005-005. 國內(nèi)客戶可以聯(lián)系靶點科技,便于開國內(nèi)可以報銷的發(fā)票提供深度撮合服務。目前是應用被廣泛認可雙重提升,文獻數(shù)以萬計的清除方法。建議優(yōu)先考慮事關全面。

2.GdCl3化合物法:已經(jīng)一種淘汰的方法表現明顯更佳。主要抑制巨噬細胞的吞噬活性。GdCl3對結腸黏膜巨噬細胞無明顯的耗竭作用技術節能。很多部位指導,包括骨髓等組織,缺乏文獻國際要求。

3.CSF-1/CSF-1R為靶點的抗體方法:巨噬細胞的產(chǎn)生流動性、增殖和存活依賴于CSF-1,并在其細胞表面高水平表達CSF-1R(CD115)競爭激烈。CSF-1能夠通過CSF-1R酪氨酸激酶的自身磷酸化和隨后下游分子的磷酸化來發(fā)揮其生物學功能持續創新。因此,以CSF-1/CSF-1R為靶點的方法也成為巨噬細胞耗竭的一種重要手段空白區f調機製?贵w法效率低(40%),成本高形勢。

4.轉基因小鼠法:缺點不用說實踐者,一是小鼠不好獲得,二是繁殖時間長服務機製,三是成本高貢獻力量,四是小鼠背景需要考慮基于白喉毒素受體(DTR)的轉基因小鼠是目前應用比較多的大幅拓展,用于巨噬細胞耗竭的轉基因模型發行速度。


盡管有這么多種方法,然而巨噬細胞清除中仍然存在一些問題與時俱進,比如性能,巨噬細胞清除效率難以量化(造尤其模不斷豐富,巨噬細胞的量是變化的,動態(tài)變化的)組建、清除的亞型難以確定各有優勢、清除對象不具有特異性即可能會損傷除巨噬細胞外的其他免疫及非免疫細胞。荷蘭LIPOSOMA的氯膦酸鹽脂質體法作為當前應用最為廣泛的巨噬細胞清除方法重要的意義,具有經(jīng)濟持續、制備簡單的優(yōu)點,但其對不同部位的巨噬細胞清除效率差異很大(通常50%~95%)再獲,不同研究組的研究結果的可靠性有待評估產品和服務。目前,巨噬細胞清除作為一種建立模型的方法被應用于大量的實驗研究體驗區,幾乎所有的方法都有其缺陷增多,以至于很多相似的實驗得出不同的實驗結果。實驗結果的不嚴謹一方面是未選擇符合自身實驗設計的耗竭方法有望,另一方面是巨噬細胞耗竭方法本身就具有很多局限性進一步推進,例如,Csf-1r基因敲除模型中CSF-1R除了能夠在巨噬細胞表達方案,還能在樹突狀細胞和單核細胞表達]應用的選擇。如果不能排除其他免疫細胞對實驗的影響,該方法則不具有嚴謹性左右。轉基因模型能夠基于細胞特異的基因設計靶向特定巨噬細胞亞型的方案背景下,具有耗竭效率高以及耗竭特異性強的優(yōu)勢,然而轉基因小鼠價格昂貴及繁育周期長是實驗設計需要考慮的重要影響因素可靠保障。因此自然條件,綜合考慮,推薦使用國際認可品牌的產(chǎn)品高端化。畢竟經(jīng)過國內(nèi)國外大量文獻的驗證力量,可靠的質量為減少自己實驗的不確定性少一個因素。

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