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LB自誘導(dǎo)培養(yǎng)基AIM原理知道少

更新時(shí)間:2023-02-17   點(diǎn)擊次數(shù):2120次

自誘導(dǎo)培養(yǎng)基Auto Induction Medium(AIM)開放要求,包含LB Broth (AIM), 2x YT Broth (AIM), Terrific Broth (AIM)示範推廣, Super Broth (AIM)置之不顧。通常的特點,外源蛋白在細(xì)菌中表達(dá)時(shí)常使用IPTG誘導(dǎo)的啟動子參與水平,如Lac啟動子順滑地配合。當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到理想值時(shí)試驗,通過向培養(yǎng)基中加入IPTG的方法誘導(dǎo)蛋白表達(dá)勞動精神。使用這個(gè)自動誘導(dǎo)培養(yǎng)基,不再需要監(jiān)測細(xì)胞密度和添加IPTG製度保障。葡萄糖作為半乳糖操縱子的阻遏因子阻止細(xì)菌利用α-乳糖預下達,而被優(yōu)先代謝,促進(jìn)高密度生長統籌推進。一旦培養(yǎng)基中的葡萄糖被耗盡(通常發(fā)生在對數(shù)期的后期)責任,乳糖被?-半乳糖苷酶轉(zhuǎn)換成異乳糖(葡萄糖-1,6-半乳糖),而后者作為IPTG誘導(dǎo)型啟動子的誘導(dǎo)劑保護好,引起乳糖阻遏子從與DNA結(jié)合的位點(diǎn)上釋放應用前景,啟動重組蛋白的表達(dá)。對于DE3基因型的E.coli中運行好,異乳糖使T7lac啟動子去阻遏首次,并誘導(dǎo)lacUV5啟動子表達(dá)T7 RNA聚合酶。通過這種方式部署安排,在細(xì)菌培養(yǎng)物生長到某一特定點(diǎn)時(shí)蛋白表達(dá)自發(fā)開始搖籃,省掉了監(jiān)測細(xì)胞密度(OD600)和添加IPTG這兩個(gè)步驟。與傳統(tǒng)IPTG誘導(dǎo)的蛋白表達(dá)過程相比推廣開來,使用自動誘導(dǎo)培養(yǎng)基極大地方便和簡化了試驗(yàn)流程推動。

LB培養(yǎng)基是一種培養(yǎng)基的名稱,生化分子實(shí)驗(yàn)中一般用該培養(yǎng)基來預(yù)培養(yǎng)菌種資源配置,使菌種成倍擴(kuò)增信息,達(dá)到使用要求。也可用于培養(yǎng)基因工程受體菌(大腸桿菌)大力發展∝S富內涵?煞譃橐后w培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。LB一般被解釋為Luria-Bertani培養(yǎng)基產能提升,然而根據(jù)其發(fā)明人貝爾塔尼(Giuseppe Bertani)的說法適應性,這個(gè)名字來源于英語的lysogeny broth,即溶菌肉湯通過活化。靶點(diǎn)科技常備LB Broth現(xiàn)貨落地生根,產(chǎn)品圖片如下:

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自誘導(dǎo)培養(yǎng)基(lac啟動子)(Auto-induction Medium)產(chǎn)品及特點(diǎn)

本產(chǎn)品是在pET專用生長培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上開發(fā)而成的,它利用E.coli自身對培養(yǎng) 基中碳源和能源的調(diào)控利用機(jī)制,實(shí)現(xiàn)外源蛋白在細(xì)菌達(dá)到飽和期后的自動誘發(fā)的特點。

具有下列特點(diǎn):

1. 不需添加任何IPTG或相關(guān)誘導(dǎo)物,節(jié)約成本。--無需IPTG

2. 免去了密切監(jiān)控菌液密度的過程,尤其適合大規(guī)模篩選 有效保障。--無需OD監(jiān)測

3. 細(xì)菌生長密度遠(yuǎn)高于IPTG誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng) 最為突出。--細(xì)菌密度高

4. 外源蛋白表達(dá)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于IPTG誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)。--表達(dá)量高

5. 本產(chǎn)品即開即用,操作簡單 相結合。--溶解即用

6. 與各種細(xì)胞培養(yǎng)容器兼容(如培養(yǎng)瓶高效化、培養(yǎng)罐、深孔管為產業發展、發(fā)酵罐等)範圍和領域。--兼容性好


過夜培養(yǎng)自動誘導(dǎo)細(xì)胞表達(dá)的培養(yǎng)基系統(tǒng),培養(yǎng)基都可以大程度上提高pET系列和其它IPTG原核誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)在大腸桿菌中蛋白的表達(dá)量各項要求,其最大的方便之處在于使用這種培養(yǎng)基不需要對大腸桿菌的生長密度進(jìn)行檢測更高要求。因?yàn)镮PTG會對細(xì)胞存在毒性,因此使用了這種不含IPTG的自動誘導(dǎo)體系培養(yǎng)基與傳統(tǒng)培養(yǎng)基相比可以使細(xì)胞數(shù)量和目的蛋白量都大大增加數(shù)倍講理論。


這種培養(yǎng)基是基于F. William Studier博士的技術(shù)的可能性,使用了不同代謝成分提高細(xì)胞的生長密度,并自動誘導(dǎo)lac啟動子開始轉(zhuǎn)錄服務為一體。Overnight Express Instant TB Medium培養(yǎng)基現(xiàn)在提供三種不同的成分問題。作為一種粉末裝TB培養(yǎng)基它可快速溶解在水中,并進(jìn)行微波加熱和高壓滅菌處理全會精神。

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