2019 年底,一項(xiàng)全新的 Western blot 成像技術(shù)—eBlot 接觸式成像勞動精神,在中國(guó)的上海醫(yī)谷創(chuàng)新面世具有重要意義。這項(xiàng)技術(shù)完美解決了傳統(tǒng) Western blot 成像儀器的靈敏度不夠優化程度、定量范圍窄勃勃生機、成像時(shí)間太長(zhǎng)以及占地面積太大的問(wèn)題實現了超越;相對(duì)于冷 CCD 成像技術(shù)顯著,eBlot 接觸式成像將成像靈敏度提升了 2-3 個(gè)數(shù)量級(jí)技術節能, 定量范圍提升 2 個(gè)數(shù)量級(jí), >95% 的樣品成像時(shí)間縮短到 1 秒以內(nèi)將進一步,且儀器的體積縮小到傳統(tǒng)儀器的 1/10 不到充分發揮。該技術(shù)一面世就受到科研人員的認(rèn)可,已幫助北京大學(xué)、上海交通大學(xué)、中科院競爭力所在、中國(guó)CDC等眾多國(guó)家學(xué)術(shù)研究單位解決了他們研究中遇到的 Western blot 成像難題。
欲了解此技術(shù)的詳情模式,我們還需要從 Western blot 的歷史和 Western blot 成像方法的歷史講起。
1981 年美國(guó)斯坦福大學(xué)的喬治·斯塔克(George Stark)發(fā)明了蛋白質(zhì)印跡(Western blot)提升,至今已有 40 年的時(shí)間高品質。Western blot 作為一個(gè)經(jīng)典的蛋白定量技術(shù),被越來(lái)越多的人所使用支撐能力,已成為每個(gè)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室所必須要做的一個(gè)實(shí)驗(yàn)資源優勢。但是 Western blot 技術(shù)本身的發(fā)展卻非常緩慢,尤其在成像檢測(cè)技術(shù)方面已有 20 多年的時(shí)間沒(méi)有新的突破特征更加明顯。
Western blot 常用的幾種成像方法及優(yōu)劣勢(shì)如下:
成像方法 | 優(yōu)勢(shì) | 劣勢(shì) | |
直接顯色法 | DAB顯色 | 1估算,操作簡(jiǎn)單 2,無(wú)需暗房 3的可能性,無(wú)需成像設(shè)備 4不要畏懼,成本低 | 1,靈敏度低問題,低豐度蛋白無(wú)法檢測(cè) 2逐漸顯現,定量范圍窄,只有 1.5OD發展機遇,表達(dá)差異大的蛋白無(wú)法準(zhǔn)確定量 |
化學(xué)發(fā)光法 | 暗房壓片 | 1長效機製,壓片過(guò)程沒(méi)有光損失,靈敏度高全技術方案,可以實(shí)現(xiàn)極微弱信號(hào)的成像 2分享,無(wú)需購(gòu)置設(shè)備 | 1,需要一個(gè)獨(dú)立的暗房 2信息化,定量范圍窄方式之一,只有 1.8OD,表達(dá)差異大的蛋白無(wú)法準(zhǔn)確定量 3新型儲能,需要膠片創新能力、顯影液定影液等耗材 |
冷 CCD 成像 | 1,定量范圍高領域,高達(dá) 4.8OD溝通機製,表達(dá)量差異大的蛋白可以準(zhǔn)確定量 2,檢測(cè)靈敏度高 | 1註入新的動力,成像過(guò)程有大量的光損失領先水平,達(dá)不到壓片的靈敏度,非常低豐度的蛋白檢測(cè)不到 2雙重提升,需要購(gòu)置冷 CCD 成像設(shè)備戰略布局、維護(hù)成本* | |
熒光法 | RGB 可見(jiàn)熒光 | 1,可以實(shí)現(xiàn)多重檢測(cè) | 1表現明顯更佳,Western 膜本身的熒光背景非常高狀態,導(dǎo)致成像靈敏度非常低,低豐度蛋白檢測(cè)不到 2,操作過(guò)程需要在避光的環(huán)境下進(jìn)行 3廣泛認同,熒光抗體種類(lèi)不夠多且成本高 4國際要求,多重檢測(cè)需要做大量的實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化 5,需要特殊的試劑 6鍛造,熒光成像設(shè)備成本高 |
近紅外熒光 | 1競爭激烈,可以實(shí)現(xiàn)多重檢測(cè) 2,相對(duì)于可見(jiàn)熒光背景低 | 1改善,Western 膜本身的熒光背景導(dǎo)致成像靈敏度不夠空白區,低豐度蛋白檢測(cè)不到 2,操作過(guò)程需要在避光的環(huán)境下進(jìn)行 3信息化,熒光抗體種類(lèi)不夠多且成本高 4形勢,多重檢測(cè)需要做大量的實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化 5,需要特殊的試劑 6平臺建設,近紅外熒光成像設(shè)備成本非常高 |
在各種成像方法中服務機製,冷 CCD 化學(xué)發(fā)光成像由于具有操作簡(jiǎn)單、靈敏度高推動並實現、定量范圍寬等優(yōu)勢(shì)薄弱點,成為了受歡迎的成像方法,被超過(guò) 99% 的科研人員所使用優化程度。
但是積極性,隨著科研的不斷深入,科研人員反應(yīng) Western blot 也越來(lái)越難做不斷豐富,科學(xué)家在 Western bot 方面面臨的難題具體表現(xiàn)在:
雖然冷 CCD 化學(xué)發(fā)光成像方法有多種優(yōu)勢(shì)活動上,被絕大多數(shù)人使用,但是由于其本身的技術(shù)限制進一步推進,在面臨超低豐度蛋白導向作用、稀有樣品和表達(dá)差異巨大的樣品時(shí)就顯得無(wú)能為力了,這些隨著科研逐步深入所帶來(lái)的難題急需新的技術(shù)出現(xiàn)來(lái)解決。
這些技術(shù)限制包括:
技術(shù)的瓶頸限制了冷 CCD 成像技術(shù)的發(fā)展,也間接影響科研的發(fā)展增強。工欲善其事必先利其器重要意義,必須要有更先進(jìn)的技術(shù)才能突破現(xiàn)有方法的瓶頸,進(jìn)而更好的為科研服務(wù)更加廣闊。
科學(xué)進(jìn)步的歷史進(jìn)程中規劃,儀器公司扮演了極其重要的角色,科學(xué)家開(kāi)發(fā)出新的技術(shù)可以使用,儀器公司利用這些技術(shù)開(kāi)發(fā)出新的工具來(lái)服務(wù)更多的科學(xué)家進入當下,循環(huán)往復(fù),持續(xù)進(jìn)步效高化。
Western 成像領(lǐng)域同樣是這樣新體系,eBlot擁有科學(xué)家團(tuán)隊(duì)和創(chuàng)新經(jīng)驗(yàn)豐富的儀器團(tuán)隊(duì),技術(shù)和創(chuàng)新的思想碰撞出了一個(gè) Western 成像領(lǐng)域的革命性突破—eBlot 接觸式成像技術(shù)發展機遇。這項(xiàng)革命性創(chuàng)新的技術(shù)克服了現(xiàn)有技術(shù)在成像靈敏度長效機製、定量范圍、成像速度和儀器體積大等諸多瓶頸全技術方案,實(shí)現(xiàn)了 Western 成像技術(shù)新的飛躍分享,幫助科學(xué)家在新的科形勢(shì)下的研競(jìng)爭(zhēng)中取得先機(jī)。
eBlot 接觸式成像技術(shù)主要突破點(diǎn)如下:
1,Western 膜直接貼在感光芯片上進(jìn)行成像方式之一,所有信號(hào)均被采集生動,沒(méi)有任何光損失,飛躍的提高了成像的靈敏度有力扭轉。
2上高質量,成像芯片的面積是現(xiàn)有成像技術(shù)芯片面積的 137 倍,超大的感光芯片具有超高的信號(hào)采集能力廣度和深度,讓極其微弱的信號(hào)都無(wú)處可藏深入交流。
3,單個(gè)像素尺寸是現(xiàn)有成像技術(shù)單個(gè)像素尺寸面積的 493 倍加強宣傳,巨大的像素可以將定量范圍提升兩個(gè)數(shù)量級(jí)臺上與臺下,實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的定量。
4技術發展,新的成像技術(shù)不再依賴于鏡頭進(jìn)行成像集聚效應,消除了鏡頭透鏡組造成的光信號(hào)損失。
5重要手段,新的成像技術(shù)可以將儀器體積壓縮到小于現(xiàn)有成像儀器體積的 1/10互動講,大大節(jié)省實(shí)驗(yàn)室空間。
生命科學(xué)領(lǐng)域發(fā)展越來(lái)越快像一棵樹,科研也進(jìn)入到范圍的高度競(jìng)爭(zhēng)狀態(tài)過程中,科研人員要跟*的科學(xué)家競(jìng)爭(zhēng),這種新形勢(shì)下的競(jìng)爭(zhēng)對(duì)于先進(jìn)工具的依賴越來(lái)越高全面協議。eBlot化學(xué)發(fā)光成像儀重要部署,幫助中國(guó)的科學(xué)家在新形勢(shì)下的激烈競(jìng)爭(zhēng)中*。
eBlot 在北京大學(xué)等各個(gè)實(shí)驗(yàn)室
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